Współczesne metody detekcji cytokin – real time PCR, ELISPOT oraz technika wewnątrzkomórkowego barwienia cytokin
Journal Title: Advances in Hygiene and Experimental Medicine - Year 2009, Vol 63, Issue
Abstract
Cytokiny są małymi hormonopodobnymi białkami warunkującymi prawidłowe funkcjonowanie układu odpornościowego. Regulują proliferację i różnicowanie komórek, wpływają na zachodzące w organizmie procesy krwiotworzenia oraz funkcjonują jako mediatory reakcji zapalnych i odpornościowych. Zaburzenia poziomu cytokin są widoczne w licznych chorobach np. posocznicy, zmianach jelit o charakterze zapalnym, chorobach autoimmunizacyjnych, a także w chorobie przeszczep przeciw biorcy. Detekcję cytokin można przeprowadzić w warunkach in vivo, in vitro lub ex vivo. Istnieje wiele metod mierzących ilość wydzielonej cytokiny np. test immunoenzymatyczny ELISA oceniający sekrecję w surowicy lub w supernatantach uzyskanych po hodowli stymulowanych komórek, techniki określające poziom cytokin w komórce (barwienie immunohistochemiczne, ELISPOT, wewnątrzkomórkowe barwienie cytokin) oraz metody oceniające sekrecję na poziomie mRNA (technika RPA, hybrydyzacja in situ, Northern-blot PCR w czasie rzeczywistym). Spośród wyżej wymienionych metod najszersze zastosowanie mają ELISPOT, metoda wewnątrzkomórkowego barwienia połączona z odczytem cytometrycznym oraz PCR w czasie rzeczywistym. Połączenie metody wewnątrzkomórkowego barwienia z analizą cytometryczną, podobnie jak i detekcja cytokinowego mRNA na skrawkach tkankowych bądź w zawiesinie komórkowej, daje możliwość oceny populacji komórek odpowiedzialnych za wydzielanie badanej cytokiny. Metody te mają duże zastosowanie kliniczne np. przy szacowaniu skuteczności szczepionek i leczenia w schorzeniach nowotworowych, a także w diagnostyce bakteriologicznej, wirusologicznej i pasożytniczej.
Authors and Affiliations
Eliza Turlej
Circadian concentrations of free testosterone, selected markers of bone metabolism, osteoprotegerin and its ligand sRANKL in obese postmenopausal women
Background: It has been suggested that increased testosterone secretion in postmenopausal obese women might have some protective effect on bone tissue; the association might be significantly influenced by the RANKL/RANK/...
Rzadkie kliniczne odmiany glejaka wielopostaciowego
Glejak wielopostaciowy, zaliczany do najwyższego stopnia złośliwości histologicznej według Światowej Organizacji Zdrowia, jest najczęstszym nowotworem pierwotnym OUN. Rozwija się głównie u osób dorosłych, umiejscawia zwy...
Seler – przyczyną ciężkiego wstrząsu anafilaktycznego
Przedstawiono przypadek 28-letniej pacjentki, u której wystąpił ciężki wstrząs anafilaktyczny po spożyciu surowego selera. Chora była w trakcie immunoterapii alergenowej (brzoza 50% i trawy 50%). Wstrząs wystąpił po 15...
Gap junction involvement in hippocampal theta rhythm generation
Hippocampal theta rhythm is probably the best example of oscillations and synchrony phenomena occurring in neuronal networks of the central nervous system. It is well known that intraneuronal communication via chemical...
Zaburzenia kontroli nerwowej przewodu pokarmowego i ból trzewny w nieswoistych chorobach zapalnych jelit
Nieswoiste zapalne choroby jelit (NZJ) są chorobami przewlekłymi o złożonej etiologii obejmującej czynniki środowiska, predyspozycje genetyczne, dysbiozę mikroflory oraz nieprawidłowości odpowiedzi immunologicznej. W prz...