Активність цитозольних ізоформ ензимів катаболізму ендогенних альдегідів за умов токсичного ураження на фоні білкової недостатності

Abstract

У роботі визначено активність альдегіддегідрогенази (КФ 1.2.1.3), альдегідредуктази (КФ 1.1.1.21), а також вміст ТБК-активних продуктів і карбонільних похідних протеїнів у цитозольній фракції печінки щурів за умов ацетамінофен-індукованого гепатиту та аліментарної білкової недостатності. Дослідження проведено на білих безпородних щурах масою 90 – 100 г, віком 2 – 2,5 місяці. У експерименті було використано 36 щурів, яких згідно з моделлю дослідження розділили на 4 групи: І група – щурі, які перебували на повноцінному напівсинтетичному раціоні (К); ІІ група – щурі, які перебували на низькопротеїновому раціоні (НПР); ІІІ – щурі з токсичним ураженням печінки, які перебували на повноцінному раціоні (ТУ); ІV – щурі з ацетамінофен-індукованим ураженням печінки, які попередньо перебували на напівсинтетичному низькопротеїновому раціоні (НПР+ТУ). Моделювання ацетамінофен-індукованого токсичного ураження печінки проводили шляхом введення peros дослідним тваринам парацетамолу з розрахунку 1250 мг/кг (0,5 LD50) маси тварин у вигляді суспензії в 2% розчині крохмального гелю. Виділення цитозольної фракції проводили методом диференційного центрифугування за температури 0-3 0С в середовищі гомогенізації, що містило сахарозу, ЕДТА та трис-НСl буфер. Активність альдегіддегідрогенази та альдегідредуктази визначали спектрофотометричним методом за швидкістю відновлення NAD+ і окислення NADН відповідно. Ензиматичну активність даних ферментів розраховували з урахуванням коефіцієнту молярної екстинкції відповідних форм нікотинамідних коферментів. Вміст ТБК-активних продуктів визначали за концентрацією забарвленого триметинового комплексу, утвореного в реакції з тіобарбітуровою кислотою. Ступінь окислювальних модифікацій білків оцінювали за кількістю гідразонових аддуктів, що утворюються при зв’язуванні карбонільних груп протеїнів із 2,4-динітрофенілгідразином. Встановлено, що найвираженіше зниження активностей досліджуваних ензимів утилізації ендогенних альдегідів спостерігається у цитозольній фракції печінки тварин з токсичним ураженням, які утримувалися за умов дефіциту харчового протеїну. Встановлений факт можна пояснити як імовірним порушенням структурно-функціональної організації ферментів та їх синтезу, так і зміною у співвідношенні редокс-форм нікотинамідних коферментів за даних експериментальних умов. Водночас у цитозольній фракції печінки тварин даної групи встановлене накопичення ТБК-активних продуктів та протеїнових карбоніл-дериватів. При цьому у білок-дефіцитних щурів статистично достовірної різниці за рівнем даних продуктів порівняно з показниками контролю не встановлено. Зроблено висновок, що показане накопичення альдегідних продуктів окислювального пошкодження ліпідів та протеїнів на фоні зниження активності ферментів, які забезпечують їх катаболізм, може лежати в основі одного з механізмів дисфункції клітин печінки за умов токсичного ураження, індукованого на фоні дефіциту харчового протеїну.

Authors and Affiliations

Oksana Voloshchuk, Galina Kopylchuk, Yuliia Mishyna

Keywords

Related Articles

Features transsulfuration pathway of homocysteine in hepatocytes rat under the conditions of protein deficiency

The work is devoted to determining the concentration of homocysteine in plasma and enzyme activity Transsulfuration pathway – cystathionine-β-synthase and cystathionine-γ-lyase in hepatocytes under the conditions of Prot...

ACUTE L-GLUTAMINE DEPRIVATION AFFECTS THE EXPRESSION OF G6PD, GPI, TKT, TALDO1, PGLS AND RPIA GENES IN U87 GLIOMA CELLS: EFFECT OF ERN1 KNOCKDOWN

Pentose-phosphate cycle of glucose metabolism plays an important role in malignant tumor growth, including glioma. We have studied the expression level of mRNA of basic enzymes of this cycle (G6PD, TKT, TALDO1, PGLS and...

POSSIBILITY OF DESMODESMUS ARMATUS (CHOD.) HEGEW. CULTIVATION IN MIXOTROPHIC CONDITIONS

The study is devoted to investigation of the possibility of green microalga Desmodesmus armatus cultivation in mixotrophic conditions. Microalgae were cultivated on the waste water from RAS. To create mixotrophic conditi...

FEEDING OF COMMON PRUSSIAN CARP СARASSIUS GIBELIO IN THE DANUBE LAKES YALPUG AND KUGURLUY

The Danube Lakes form the most lake complex in Ukraine. The Yalpug Lake is the largest lake within the complex. Its area is about 149 km2, volume – about 387 million m3. Yalpug connects Kugurluj Lake in the south with a...

Акумуляція радіонуклідів у молоді та дорослих особин сріблястого карася (Carassius gibelio) запорізького водосховища

Досліджено процеси міграції та накопичення радіонуклідів у різновікових особин карася сріблястого (Carassius gibelio) в Запорізькому водосховищі – водоймі багатоцільового призначення. Водосховище розташоване в Дніпровськ...

Download PDF file
  • EP ID EP307576
  • DOI -
  • Views 104
  • Downloads 0

How To Cite

Oksana Voloshchuk, Galina Kopylchuk, Yuliia Mishyna (2016). Активність цитозольних ізоформ ензимів катаболізму ендогенних альдегідів за умов токсичного ураження на фоні білкової недостатності. Naukovyi visnyk Chernivetskoho universytetu. Biolohiia (Biolohichni systemy), 8(2), 166-170. https://www.europub.co.uk/articles/-A-307576