Патогенетические механизмы возникновения ревматоидного артрита и анкилозирующего спондилита за участием активизационно-энзиматических и фенотипических особенностей лимфоцитов
Journal Title: Lviv Clinical Bulletin - Year 2018, Vol 3, Issue 23
Abstract
Значительная распространенность воспалительных заболеваний суставов, тенденция к неуклонному нарастанию их тяжести, высокие показатели в результате этого временной потере трудоспособности и инвалидности, особенно лиц среднего трудоспособного возраста, определяют важное медико-социальное значение этих болезней. На современном этапе РА и АС рассматриваются как заболевание, в основе которых лежат иммунные нарушения. Известно, что лимфоциты крови являются ключевыми клетками иммунной системы, которые играют ведущую роль в обеспечении компенсаторно-приспособительных реакций организма. Разнообразие висцеральных проявлений воспалительных заболеваний заболеваний свидетельствует об участии универсальных механизмов реализации системного патолоґичного процесса с участием полипотентных мессенджеров, которые обладают мультифункциональными эффектами. К таким универсальным мессенджерам принадлежат оксид азота (NO), ионы кальция Са2+ (Са2+), которые прямо или косвенно регулируют различные физиолого-биохимические процессы. Исследования последних десятилетий в области биохимии и физиологии свидетельствуют, что прецизионный контроль (NO) и (Са2+) обеспечивается функционирование ферментативных систем клетки. Среди последних ведущая роль в поддержании NO- и ионного гомеостаза клетки принадлежит NO-синтазе, аргиназе и АТФ-азам. Однако, несмотря на значительное количество работ, посвященных изучению энзиматического спектра лимфоцитов, исследования функциональной активности их аргиназо-NO-синтазного и АТФ-азных систем крайне ограничены, а патофизиологические и иммунные механизмы их дисфункции - невыясненными. Цель. Выяснить патофизиологические механизмы возникновения ревматоидного артрита и анкилозирующего спондилита с участием аргиназо-NO-синтазного и АТФ-гидролазних систем лимфоцитов крови и клеточного звена иммунитета. Материалы и методы. После получения письменного согласия на проведение комплексного обследования в соответствии с принципами Хельсинкской декларации прав человека, Конвенции Совета Европы о правах человека и биомедицине и соответствующих законов Украины, а также комплексного клинико-лабораторного и инструментального обследования всех органов и систем в соответствии с требованиями современной медицины в рандомизированный способ привлечено в исследование 86 больных (48 женщин (56,0%) и 38 мужчин (44,0%) в возрасте от 18 до 56 лет), находившихся на стационарном лечении в ревматологическом отделении КЗ ЛОР "Львовская областная клиническая больница" в 2012-2015гг. с предыдущей стратификацией при наличии у 50 больных РА (39 женщин (78,0%) и 11 мужчин (22,0%) в возрасте от 18 до 56 лет, с результатах обследований «Ревматоидный артрит: полиартрит; сероположительный вариант, anti-CCP (+ ) хроническое течение, с поражением мелких суставов кистей, стоп, луче-запястных, коленных суставов. Rtg II стадии; ФНС II степени») и у 36 больных АС (9 женщин (25,0%), 27 мужчин (75 0%) с результатах обследований «Анкилозирующий спондилит: акт. II степени; центральная форма, хроническое течение, с поражением илеосакральных соединений, тазобедренных, плечевых суставов, шейного отдела позвонка; Rtg ІІ стадия; ФНС II степени») Моноядерные лимфоциты периферической крови человека выделяли из гепаринизированной свежополучаемой крови в ґрадиенте плотности фикол-триумбраста [11]. Жизнеспособность лимфоцитов, которая во всех опытах составляла не менее 95,0%, оценивали по окраске трипановым синим. Для пермеабилизации мембран лимфоцитов крови и раскрытия латентных ферментативных активностей к суспензии лимфоцитов добавляли 0,1-0,3% сапонина. Количественное определение популяций и субпопуляций лимфоцитов определяли методом непрямой иммунофлуоресцентной реакции с моноклональными антителами к дифференцирующим антигенам поверхности клетки. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов по поглощающей способности проводили на основе метода, основанного на эндоцитозе фагоцитами частиц латекса, виализирующего в цитоплазме клеток в виде круглых гранул синего цвета. Активность NO-синтазы определяли по специфическому расщеплению NADPH(H+). Активность арґиназы лимфоцитов крови определяли по образованию мочевины. Са2+, Мg2+ - и Na+, K+-ATФазную активность лимфоцитов крови определяли спектрофотометрически, регистрируя процесс гидролиза АТФ накоплением Рі. Содержание протеина в лимфоцитарной смеси определяли по модифицированному методу А. Лоури. Результаты исследований. В результате проведенных исследований выявлены изменения активности аргиназо-NO-синтазной системы лимфоцитов крови, нарушение функциональной активности клеток фагоцитарной системы и изменение соотношений субпопуляций Т-лимфоцитов у пациентов с воспалительными заболеваниями суставов. Рост активности iNOS у этих пациентов сопровождается компенсаторным ингибированием активности эндотелиальной изоформы NOS. Значительная активация iNOS активности ведет к избыточному образованию NO в лимфоцитах крови. NO в высоких концентрациях инициирует процессы оксидативного и нитрозивного стресса, которые ведут к нарушению прооксидантно-антиоксидантного равновесия. В результате этого происходит активация апоптичних механизмов и инициация деструктивных процессов в клетках, ведет к нарастанию дисфункции. В то же время, подавление активности ATФазних систем свидетельствует о перегрузке цитозоля лимфоцитов ионами Na+ и Ca2+ и нарушения ионного гомеостаза, способствует возникновению клеточных нарушений. Выводы. У больных ревматоидным артритом в результате уменьшенного количества Т-цитотоксических лимфоцитов достоверно увеличивается количество Т-хелперов, натуральных киллерных клеток, активированных и регуляторных Т-лимфоцитов, клеток с супрессивной активацией, что указывает на активацию клеточного звена аутоагресии с включением регуляторных механизмов, а у больных анкилозирующим спондилитом - активация натуральных киллерных клеток, активированных Т-лимфоцитов, лимфоцитов с супрессивной активацией и снижение числа регуляторных лимфоцитов, что указывает на усиление им иммунологического воспалительного процесса. Более выраженные изменения хелперно-цитотоксических (CD4+ и CD8+), активированных (CD3+/CDHLA-DR+), супресивных (CD4-/CD25+) Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов (CD19+), регуляторных клеток (CD4+/CD25+) верифицированы у больных ревматоидный артрит, по сравнению с больными анкилозирующим спондилитом, что свидетельствует о наличии более мощной иммунозависимой аутоагресии у больных ревматоидным артритом. Нарушение клеточного звена иммунитета сопровождается угнетением активности эндотелиальной NO-синтазы лимфоцитов крови пациентов с ревматоидным артритом на 34,9±7,8% (р<0,05), у пациентов с анкилозирующим спондилитом - на 43,4±6,2% (р <0,001) по сравнению с практически здоровыми лицами с одновременной активацией ее индуцибельной изоформы. Активность арґиназы лимфоцитов крови пациентов с ревматоидным артритом увеличивается на 178,3±22,3% (р<0,001), с анкилозирующим спондилитом - на 272,6±30,2% (р<0,001) по сравнению с практически здоровыми лицами. Нарушение синтеза NO сопровождалось угнетением активности Ca2+,Mg2+ - АТФазы плазматической мембраны лимфоцитов крови пациентов с РА на 46,8±5,7% (р<0,001), у пациентов с АС - на 39,4±6,4% (р < 0,001), активности Ca2+,Mg2+ -АТФазы мембран ЭПР лимфоцитов крови пациентов с обеими патологиями на 35,6±4,8% (р<0,001) и 20,0±3,8% (р<0,001) соответственно; активности Na+,K+-АТФазы лимфоцитов крови пациентов с обеими патологиями на 42,8±7,2% (р<0,001) и 39,7±6,5% (р<0,001) соответственно по сравнению с практически здоровыми лицами. Изменения активностей аргиназо-NO-синтазной и АТФазной систем лимфоцитов крови у пациентов с ревматоидным артритом более выражены, чем с анкилозирующим спондилитом, однако чувствительным параметром является активность iNOS, что свидетельствует об определяющей роли нарушений в этой регуляторной системе для формирования и нарастания воспалительного поражения суставов.
Authors and Affiliations
N. Lychkovska, V. Chopyak, Z. Vorobets
Keywords
Related Articles
- EP ID EP408274
- DOI 10.25040/lkv2018.03.034
- Views 153
- Downloads 0
Проґнозування тривалого утримання синусового ритму після кардіоверсії у пацієнтів з неклапанною персистентною фібриляцією передсердь
Вступ. Вибір оптимальної стратегії ведення пацієнтів з персистентною фібриляцією передсердь (ФП) і доцільність тривалого антиаритмічного лікування після кардіоверсії дуже залежать від імовірності рецидиву аритмії. Мета....
Эффективность лечения больных пептической язвой двенадцатиперстной кишки во Львовской области (ретроспективный анализ)
Введение. Распространенность инфекции H. рylori снижалась в последние годы. Однако процессы миграции населения нивелируют эту разницу, а снижение темпов распространения Н. pylori в последнее время замедляется. Кроме этог...
Lipid Peroxidation and Antioxidant System in Men with Urogenital Lesions after Stomach Resection
Introduction. For the treatment of complicated peptic ulcer (PU) of gastroduodenal zone (GDZ) gastrectomy (GE) is still preferred, but in 78.3% of operated post-gastrorectomy disease (PGD) occurs, which can be in a form...
Інформативність поєднання молекулярно-ґенетичних і цитоґенетичних методів діаґностики мієлофіброзу
Вивчено інформативність молекулярно-ґенетичних і цитоґенетичних клональних маркерів мієлофіброзу, а також їх поєднання для діаґностики та проґнозування перебігу цього захворювання. В дослідженні взяло участь 37 хворих (3...
The Peculiarities of the Endothelial Function, Blood Lipid Spectrum and Heart Rate Variability in Patients with Stable Angina, Depending on the Heart Rate Frequency
Introduction. Endothelium plays an important role in the adaptation of coronary blood flow to myocardial oxygen demand in case of angina pectoris. In case of damage there is an imbalance between the level of endothelium...